Klinische Diagnostik

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Vorteile

• Sensitiv
  Nachweis von weniger als 50 MRSA Partikel pro Probe.
• Spezifisch
  Onar^®MRSA Screen weist sicher und spezifisch das
  Methicillin-Resistenz-Gen mecA nach.
• Schnell und Belastbar
  Das Produkt enthält eine Positivkontrolle sowie eine spezifische interne Amplifikationskontrolle für eine optionale Qualitätskontrolle. Die Ergebnisse liegen innerhalb von 60 min. bis maximal 2,5 Stunden vor.
• Einfache Handhabung
  Der Kit enthält alle notwendigen Reagenzien sowie ein einfaches Protokoll zur Erstellung des Mastermixes und Programmierung verschiedener real-time PCR-Geräte.

Hintergrund

MRSA ist ein spezieller Stamm des Bakteriums Staphylococcus aureus. Dieser Stamm hat eine Antibiotikaresistenz gegen unterschiedlichste Penicillin, inclusive Methicillin entwickelt. MRSA infiziert das Gewebe nach Durchdringung der natürlichen Schutzschichten (e.g. Haut, Schleimhaut). Die Infektion führt zur Bildung von Furunkeln und bei schweren Verläufen zur Sepsis. Der Methicillin-resistente Staphylococcus aureus wird häufig in Verbindung mit nosokomialen Infektionen beschrieben.

 

Abb. C: Sccmec-Element

(Staphylococcal chromosomal cassette mec)

 

Der Nachweis des methicillin-resistenten Staphylococcus aureus (MRSA) erfolgt ausschließlich über die Detektion des im Sccmec-Element lokalisierten mecA Gens.

Die anschließende Bestätigung des S. aureus erfolgt nicht über den S. aureus spezifischen Genbereich (orfX), sondern wird über den Nachweis des S. aureus-spezifischen Gens femA erbracht.

 

 

Kitkomponenten

• Lyophylisiertes Gemisch aus Primern, Sonden und Nukleotiden
• 10x Reaktionspuffer, optimiert für die Verwendung der
  MB Taq Polymerase
• Positivkontrolle zur Vereinfachung der Testauswertung
• Interne Amplifikationskontrolle zur Identifizierung von
  PCR-Inhibitionen und falsch-negativen Ergebnissen
• Gebrauchsanweisung
• Kunststoffbox für eine optimale Lagerung
  

Nur die Probe sowie die Polymerase werden zusätzlich benötigt.

 

Testprinzip

Das Kit Onar^®MRSA Screen ermöglicht den qualitative und wenn gewünscht auch den quantitative Nachweis von MRSA in klinischen Proben. Der Kit kann mit allen real-time PCR-Geräten verwendet werden, die eine Möglichkeit zur Anregung und Detektion von FAM und ROX bieten. Die im Kit enthaltenen Primer, Sonden und die Positivkontrolle sind für das mecA-Gen des Genoms Methicillin-resistenter Staphylococcus aureus spezifisch. Bei erfolgter Genamplifikation fluoresziert die Sonde für das Zielgen bei einer Wellenlänge von 520 nm. Die Inhibition der PCR durch eventuell in der Probe enthaltene Substanzen wird durch die im Kit enthaltene Amplifikationskontrolle überprüft. Die Amplifikationskontrolle liegt separat vor, damit wenn gewünscht auch die Probenaufbereitung kontrolliert werden kann. Bei erfolgreicher PCR wird die Sonde der Internen Amplifikationskontrolle Licht mit einer Wellenlänge von
600 nm emittieren.