Labor Diagnostik

---

PCR Quantifizierungsstandards (QS)

Der PCR Quantifizierungsstandards ist genomische DNA extrahiert aus Zellen einer frühen Passage definierter Mykoplasmen oder Legionellen, die in Flüssigmedium gemäß der European Pharmacopoeia oder in Hayflick´s Medium kultiviert wurden. Die Extraktion der DNA wird mit Absorbtionssäulen durchgeführt, anschliessend wird die DNA durch Phenol/Chloroform Extraktion und Ethanol-Fällung gereinigt. Die Konzentration wird photometrisch bestimmt und durch die real-time PCR Methode verifiziert. Die entsprechende DNA Konzentration wurde durch Verfdünnen der DNA in DNA-stabilisierenden Puffer erreicht. Genomische DNA wird als Kontroll-Template für DNA Amplifikationstests in der konventionellen PCR verwendet (z. B. Im Zusammenhang mit der Kontaminationskontrolle in der Zellkultur). Im Bereich der real-time PCR Technologie wird der titrierte DNA Standard mit definierter Konzentration von genomischen Kopien zum Kalibrieren und Generieren von Standardkurven verwendet. Dazu wird die Lösung in Verdünnungsserien (10fache Verdünnungen) mit DNA-freien Wasser an- und diese als PCR Probe eingesetzt.

Anwendung

DNA-Standards erlauben die Durchführung von Kontrollreaktionen bei der PCR im Zusammenhang mit real-time PCR Tests. Sie dienen dazu, Standardkurven für Quantifizierungsexperimente zu erstellen, z. B. mit dem Venor^®Mp Mycoplasma pneumoniae Diagnostik Kit für die real-time PCR. DNA Standards werden zudem als allgemeine Kontrolle von real-time PCR Systemen angewandt und für die Validierung von Detektionslimits in bezug auf die konventionelle PCR.

Inhalt

1 Gefäß (grüner Deckel) Standard DNA, 100 µl, enthält 10⁶ Genome/µl.

3 Gefäße (weisser Deckel) mit 1 ml DNA freiem Wasser.

Bestellung